Andor生物发光/化学发光/超弱发光成像

生物发光 (Bioluminescent)

将荧光素酶基因连接于启动子下游,稳定整合到细胞的染色体内,使荧光素酶得到持续表达,在体内,荧光素酶在ATP,氧气存在的条件下,与外源注入的特异底物反应产生发光现象。因此仅在活细胞内才会出现发光,并且发光强度与标记细胞数目线性相关

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化学发光 (Chemiluminescent)

依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在—定条件下呈线性定量关系的原理。体系产生化学发光,必须具有一个产生可检测信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应


超微弱发光(BPE)

活的生物(包括∶各种动植物细胞,植物,动物,人)存在的自发光的光子辐射,与生物的氧化代谢,细胞的分裂和死亡,光合作用,癌变以及生长调控等许多基本的生命过程都有着内在的联系。这种光子发射及其微弱,只有几个到几千个光子/秒每平方厘米,其光谱范围颇宽,从紫外延伸至近红外,必须用单光子探测器(EMCCD)或深制冷科研级CCD才能探测到


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利用andor EMCCD进行化学发光成像,EM增益1X时,无法区分信号和噪音,EM增益500X时,清晰的将信号和噪音区分开


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不同时期,小鼠背部和腹部体内生物发光成像,根据光子计数定量发光强度,不同强度代表MPO(髓过氧化物酶)活性


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拟南芥植物化学发光实验,通过发光强度定量细胞外ATP受体


系统组成

暗箱∶ 屏蔽一切光源,宇宙射线

Andor大靶面iKon系列科研级CCD,真空制冷温度可达-100℃,暗电流低达0.000059e-/pixel/sec,光电转换效率QE峰值可达95%,成像面积可达27.6mmX27.6mm,像素可达2048 X 2048,像素尺寸13.5μm,高动态范围,满井电子100,000,16bit数字输出,读出噪声<2.9e-@50khz,最大读出速率可达5fps,专业图像采集分析软件∶


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大孔径镜头 物镜


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探测器∶大靶面单光子探测器EMCCD或真空深制冷-100℃科研级CCD


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全封闭铝合金暗箱